產(chǎn)品介紹：

　UltraSYBR Mixture（Low ROX）是專用于染料法（SYBR Green I）實(shí)時(shí)熒光定量PCR的預(yù)混體系，濃度為2×，包含 GoldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、SYBR Green I 熒光染料和Mg2+和Low ROX校正染料，操作簡(jiǎn)單方便。主要用于基因組DNA靶序列和RNA反轉(zhuǎn)錄后cDNA靶序列的檢測(cè)。

　　本品所含的熒光染料SYBR Green I可以與所有的雙鏈DNA結(jié)合，使該產(chǎn)品可用于不同靶序列的檢測(cè)而不需合成特異性標(biāo)記探針。本品含有的GoldStar Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)化學(xué)修飾的、全新高效熱啟動(dòng)酶，在常溫下沒有聚合酶活性，有效避免在常溫條件下由引物和模板非特異性結(jié)合或引物二聚體而產(chǎn)生的非特異性擴(kuò)增，酶的激活須在95℃下孵育10分鐘。*的PCR緩沖體系與熱啟動(dòng)酶的組合，有效抑制了非特異性的PCR擴(kuò)增，顯著提高了PCR的擴(kuò)增效率

產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) UltraSYBR Low ROX qPCR預(yù)混試劑

產(chǎn)品貨號(hào)：CW2601H

產(chǎn)品組份：

推薦PCR反應(yīng)體系：

實(shí)驗(yàn)優(yōu)化方案：

在熒光定量反應(yīng)條件優(yōu)化時(shí)，應(yīng)從引物濃度、退火溫度、延伸時(shí)間等方面進(jìn)行考慮，

以提高反應(yīng)特異性和擴(kuò)增效率。

1．反應(yīng)特異性和擴(kuò)增效率高的實(shí)驗(yàn)體系應(yīng)具備以下條件：

1）反應(yīng)特異性高：陰性對(duì)照無引物二聚體等非特異性擴(kuò)增；不產(chǎn)生目的片段以外擴(kuò)增。

2）擴(kuò)增效率高：Ct值低；PCR擴(kuò)增效率高，接近理論值100%。

2．反應(yīng)條件優(yōu)化方法：

1）引物濃度：通常引物濃度以0.2 μM可得到較好結(jié)果，可以終濃度0.1-1.0 μM作為設(shè)定范圍的參考。若提高反應(yīng)特異性，可降低引物濃度；若提高擴(kuò)增效率，可增加引

物的濃度，由此優(yōu)化反應(yīng)體系。

2）退火溫度：建議采用兩步法PCR，退火溫度60℃進(jìn)行反應(yīng)。若提高反應(yīng)特異性，可提高退火溫度，以60-64℃作為設(shè)定范圍的參考。若因使用Tm值較低的引物等原因，得不到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí)，可嘗試進(jìn)行三步法PCR擴(kuò)增，三步法的退火溫度請(qǐng)以56℃-64℃的范圍作為設(shè)定參考。

3）延伸時(shí)間：建議采用兩步法PCR，延伸時(shí)間1 min進(jìn)行反應(yīng)。若提高擴(kuò)增效率，可嘗試將延伸時(shí)間增加，或嘗試三步法PCR。

使用注意：

1．使用前請(qǐng)上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，并經(jīng)短暫離心后使用。

2．本產(chǎn)品中含有SYBR Green I熒光染料和ROX染料，保存本產(chǎn)品或配制PCR反應(yīng)液

時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光照射。

3．避免反復(fù)凍融本品，反復(fù)凍融可能使產(chǎn)品性能下降。

4．本品不能用于探針法熒光定量PCR。

5．配制反應(yīng)液時(shí)，請(qǐng)使用新的或者無污染的槍頭和離心管，盡量防止污染。

6.  本產(chǎn)品預(yù)變性反應(yīng)必須在95℃ 10分鐘下完成！

儲(chǔ)存與運(yùn)輸：

-20℃，如需頻繁使用，可存放于2-8℃，盡量避免反復(fù)凍融

產(chǎn)品訂購信息：

品牌             貨號(hào)                   名稱                              規(guī)格

康為世紀(jì)   CW2601S UltraSYBR Mixture（Low ROX）   1 ml

康為世紀(jì)   CW2601M UltraSYBR Mixture（Low ROX）   5 ml

康為世紀(jì)   CW2601H UltraSYBR Mixture（Low ROX）   40ml

產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) UltraSYBR Low ROX qPCR預(yù)混試劑

產(chǎn)品貨號(hào)：CW2601H

關(guān)于公司：

康為世紀(jì)生物科技股份有限公司是一家立足于生命科學(xué)領(lǐng)域，有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國家優(yōu)良企業(yè)，主要從事高附加值、高技術(shù)含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn)，為生命科學(xué)研究、基因檢測(cè)和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務(wù)。公司曾先后被評(píng)為國家優(yōu)良企業(yè)、江蘇省科技型中小企業(yè)、江蘇省瞪羚企業(yè)、江蘇省民營(yíng)科技企業(yè)。公司建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的技術(shù)創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺(tái)，構(gòu)建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。

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