產(chǎn)品簡介：

HS Probe qPCR預(yù)混試劑是一款適用于探針法的Real time PCR（qPCR）反應(yīng)的通用試劑。包含了除模板，引物，探針外所有的組分。優(yōu)選的熱啟動(dòng)Taq DNA polymerase，配合針對(duì)低拷貝模板而優(yōu)化的緩沖液，可以有效抑制非特異性擴(kuò)增，大大增加qPCR擴(kuò)增效率以及檢測(cè)靈敏度，適用于進(jìn)行高靈敏度的qPCR反應(yīng)。參比染料rox隨試劑盒提供。

本產(chǎn)品使用前只需要加入引物、模板、探針、ROX（根據(jù)使用的機(jī)型而定）、水；利用本產(chǎn)品可在廣泛的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確的定量、定性和SNP檢測(cè)，具有重復(fù)性好、可信度高、并兼容各種不同類型的qPCR探針的特點(diǎn)。

產(chǎn)品名稱：紅榮微再 HS Probe qPCR預(yù)混試劑

產(chǎn)品貨號(hào)：RF-Q3001

產(chǎn)品應(yīng)用：

基因表達(dá)分析

• 地拷貝基因檢測(cè)

• SNP和等位基因分型

• 測(cè)序和微陣列結(jié)果的驗(yàn)證

儲(chǔ)存與運(yùn)輸：

1. 冰上運(yùn)輸

2. 到貨后-20℃恒溫冷凍冰箱避光保存。

常用Q&A:

Q: 擴(kuò)增曲線異常

1、擴(kuò)增曲線不光滑：

系統(tǒng)需要校正，提高模板濃度；

ROX 使用錯(cuò)誤，更換正確的ROX 類型。

2、擴(kuò)增曲線斷裂或下滑：

模板濃度高，提高閾值并重新分析數(shù)據(jù)；

降低模板濃度。

3、個(gè)別擴(kuò)增曲線驟降：

反應(yīng)管有氣泡。處理樣本時(shí)注意離心。

Q：反應(yīng)結(jié)束無擴(kuò)增曲線

1、循環(huán)數(shù)不夠：一般設(shè)40 個(gè)循環(huán)，但要注意過多循環(huán)數(shù)增加背景信號(hào)，降低數(shù)據(jù)可信度。

2、確認(rèn)程序中是否設(shè)置信號(hào)采集：兩步法的擴(kuò)增程序一般在退火/延伸階段采集信號(hào)；三步法擴(kuò)增信

號(hào)采集設(shè)置在延伸階段。

3、引物降解：PAGE 檢測(cè)排除其降解的可能性。

4、模板濃度太低：減少稀釋度重復(fù)實(shí)驗(yàn)，先從高濃度做起。

5、模板降解：重新制備模板。

Q: Ct 值太高

1、擴(kuò)增效率低：優(yōu)化反應(yīng)條件，嘗試三步法擴(kuò)增，或重新設(shè)計(jì)合成引物。

2、模板濃度低：減少稀釋度，先從高濃度做起。

3、模板降解：重新制備模板。

4、PCR 產(chǎn)物太長：推薦 PCR 產(chǎn)物長度 80-150 bp。

5、存在 PCR 抑制劑：若為模板帶入，加大模板稀釋倍數(shù)或重新制備模板。

Q：陰性對(duì)照出現(xiàn)明顯擴(kuò)增

1、反應(yīng)體系污染：更換新的Mix、水、引物等重復(fù)實(shí)驗(yàn)；反應(yīng)體系在超凈工作臺(tái)內(nèi)配制，減少氣溶膠污染。

2、引物設(shè)計(jì)不合理：重新設(shè)計(jì)并合成引物。

產(chǎn)品名稱：紅榮微再 HS Probe qPCR預(yù)混試劑

產(chǎn)品貨號(hào)：RF-Q3001

關(guān)于公司：

紅榮微再作為RNA、NGS、ctDNA、qPCR的分子診斷專業(yè)供應(yīng)商，以“傳遞科學(xué)價(jià)值，服務(wù)科學(xué)研究"為宗旨,努力為客戶提供質(zhì)量可靠、貨美價(jià)優(yōu)的分子診斷試劑耗材，與客戶攜手為中國分子診斷的發(fā)展而前行。

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