Ficoll-Paque density gradient media 淋巴細(xì)胞分離液

產(chǎn)品英文名稱：Ficoll-Paque density gradient media

產(chǎn)品中文名稱：Ficoll-Paque密度梯度分離液，淋巴細(xì)胞分離液，單個(gè)核細(xì)胞分離液

產(chǎn)品概述 GE淋巴細(xì)胞分離液是一種無(wú)菌、即用型的淋巴細(xì)胞分離液，根據(jù)外周血中各類細(xì)胞在密度梯度離心中呈現(xiàn)不同的密度梯度分布而將全血中的淋巴細(xì)胞等單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行分離。適用人外周血、骨髓和臍帶血的單個(gè)核細(xì)胞分離。與Ficoll-Paque PLUS不同的是，F(xiàn)icoll-Paque PREMIUM的生產(chǎn)是在嚴(yán)格控制環(huán)境下完成的, 生產(chǎn)條件符合ISO 13485標(biāo)準(zhǔn)，GMP認(rèn)證和美國(guó)藥典，可用于生產(chǎn)臨床級(jí)細(xì)胞治療相關(guān)產(chǎn)品。

Ficoll-Paque是從骨髓和血液分離人單核細(xì)胞的試劑。Ficoll-Paque*性性能和可重現(xiàn)性結(jié)果的堅(jiān)實(shí)信譽(yù)是其在市場(chǎng)上銷售30多年并被成千上萬(wàn)的同行評(píng)審文章所引用。

Ficoll-Paque產(chǎn)品是高分子量蔗糖聚合物和泛影-酸鈉溶液。Ficoll-Paque密度梯度介質(zhì)利用簡(jiǎn)單快速離心程序從少量或大量血液中有效提取高產(chǎn)和高純度的活單核細(xì)胞。Ficoll-Paque PLUS是無(wú)菌即用型產(chǎn)品，推薦用于單個(gè)核細(xì)胞的常規(guī)分離。

2005年，GE醫(yī)療推出Ficoll Paque PREMIUM在質(zhì)量管理系統(tǒng)下生產(chǎn)，符合 ISO 13485:2003標(biāo)準(zhǔn)。Ficoll-Paque PREMIUM設(shè)計(jì)用于制備人單個(gè)核細(xì)胞。注：Ficoll-Paque被視為常規(guī)實(shí)驗(yàn)室試劑，并未歸類為醫(yī)療設(shè)備。

主要特征

經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制測(cè)試

分離所得的細(xì)胞存活細(xì)胞率>90%

低水平內(nèi)毒素

質(zhì)量管理系統(tǒng)下生產(chǎn)，符合ISO 13485:2003標(biāo)準(zhǔn)（Ficoll-Paque PREMIUM）

正確存儲(chǔ)條件下穩(wěn)定性至少保持3年

Ficoll-Paque淋巴細(xì)胞分離液產(chǎn)品分類

Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml單個(gè)核細(xì)胞分離液適用血液、骨髓和臍帶血來(lái)源的人單個(gè)核細(xì)胞分離制備，臨床研究和細(xì)胞治療生產(chǎn)級(jí)別。后續(xù)可以通過(guò)培養(yǎng)分離得到間充質(zhì)干細(xì)胞。

Ficoll-Paque PREMIUM 1.073,1.073 g/ml 單個(gè)核細(xì)胞分離液適用密度較低的人單個(gè)核細(xì)胞的富集，如間充質(zhì)干細(xì)胞和單核細(xì)胞，同樣應(yīng)用于臨床研究和細(xì)胞治療。

Ficoll-Paque PLUS 用于人外周血的單個(gè)核細(xì)胞分離，僅供科研使用。

GE Ficoll-Paque 獲得的單個(gè)核細(xì)胞（含淋巴細(xì)胞）懸液具有以下特點(diǎn)：

分離所得的細(xì)胞中95 ± 5%為單個(gè)核細(xì)胞

分離所得的細(xì)胞存活細(xì)胞率 > 90%

可回收原始的血液樣本中60 ± 20%的單個(gè)核細(xì)胞

3 ± 2%的粒細(xì)胞

5 ± 2%的紅細(xì)胞

Ficoll-Paque PREMIUM改良于Ficoll-Paque PLUS，后者作為一種從骨髓、外周血和臍帶血中高得率分離單個(gè)核細(xì)胞的無(wú)菌密度梯度介質(zhì)已應(yīng)用了三十多年。與Ficoll-Paque PLUS不同的是，F(xiàn)icoll-Paque PREMIUM的生產(chǎn)是在嚴(yán)格控制環(huán)境下完成的, 生產(chǎn)條件符合ISO 13485:2003標(biāo)準(zhǔn)，GMP認(rèn)證和美國(guó)藥典的建議，可用于生產(chǎn)細(xì)胞治療相關(guān)產(chǎn)品。細(xì)胞毒性等級(jí)為0。有RSF文件。

Ficoll-Paque PLUS淋巴細(xì)胞分離液產(chǎn)品參數(shù)：

物理狀態(tài)：無(wú)色液體

密度：1.078 g/ml

pH范圍：5.5-7.5

內(nèi)毒素活性：< 0.12 EU/ml

有效期：3年

保存：4℃-30℃

成分：Ficoll-Paque PLUS是一種無(wú)菌的、即用型的試劑，含有Ficoll PM400、泛影-酸鈉和二鈉鈣EDTA。密度已經(jīng)被優(yōu)化，用于分離外周血的人淋巴細(xì)胞。

應(yīng)用

人外周血、骨髓和臍帶血淋巴細(xì)胞分離

骨髓、胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞分離

密度梯度離心原理

見圖，以人外周血為例，血液加入Ficoll-Paque密度梯度分離液后離心分層，從上到下分四層：

血漿層

單個(gè)核細(xì)胞層：淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、血小板（骨髓和臍帶血等樣本還有間充質(zhì)干細(xì)胞）

Ficoll-Paque分離液層：密度1.077g/mL

紅細(xì)胞、粒細(xì)胞層

紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞比重較大，為1.092左右，而淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞比重較小，為1.075～1.090。Ficoll-Paque密度1.077g/mL介于兩者之間，并且分離液中的Ficoll PM400是一種高聚糖，能促進(jìn)紅細(xì)胞凝集。

名詞解釋

來(lái)源：網(wǎng)絡(luò)

Ficoll密度梯度離心

常用來(lái)分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）的分層液比重是 1.077±0.001 的聚蔗糖(Ficoll)-泛影-葡胺(Urografin)(F／H)分層液。Ficoll是蔗糖的多聚體，呈中性，平均分子量為400,000，當(dāng)密度為1.2g／ml仍未超出正常生理性滲透壓,也不穿過(guò)生物膜。紅細(xì)胞、粒細(xì)胞比重大，離心后沉于管底；淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的比重小于或等于分層液比重，離心后漂浮于分層液的液面上，也可有少部分細(xì)胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細(xì)胞，就可從外周血中分離到單個(gè)核細(xì)胞。

單個(gè)核細(xì)胞

外周血單個(gè)核細(xì)胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。

這是一個(gè)含義不明確的術(shù)語(yǔ)，常用于指組織切片或血液白細(xì)胞組分中的單個(gè)核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)或淋巴細(xì)胞或兩者的混合物，是相對(duì)于多形核細(xì)胞而言的。

血細(xì)胞和密度

利用細(xì)胞的比重不同，可把血細(xì)胞分成不同的比重層次，外周血中紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞比重較大，為1.092左右，而淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞比重較小，為1.075～1.090。配制比重介于1.075～1.090之間的等滲液，通常用聚蔗糖(商品名Ficoll)與泛影-葡胺，用此比重的等滲液作密度梯度離心，使比重大于此比重的紅細(xì)胞、多形核粒細(xì)胞沉于管底，淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浮于分層液與血液界面上，可用吸管吸出。這種方法分離出的淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞稱為單個(gè)核細(xì)胞。在干細(xì)胞采聚過(guò)程中，外周血或骨髓中的造血干細(xì)胞比重亦與淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞相同。因而，分離的單個(gè)核細(xì)胞中含有造血干細(xì)胞。

血液中的細(xì)胞成分。根據(jù)細(xì)胞質(zhì)中有無(wú)血紅蛋白，血細(xì)胞被分為紅細(xì)胞和白細(xì)胞。白細(xì)胞根據(jù)其胞質(zhì)中有無(wú)顆粒又分為有粒白細(xì)胞和無(wú)粒白細(xì)胞。有粒白細(xì)胞又根據(jù)其顆粒的染色特性分為嗜酸粒細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞。無(wú)粒白細(xì)胞又根據(jù)其大小、核質(zhì)比例和染色性質(zhì)分為單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。

Ficoll PM400

高分子量蔗糖聚合物，由蔗糖與環(huán)氧氯丙烷共聚而成。分子被高度分支，高羥基含量導(dǎo)致水介質(zhì)中良好的可溶性。能促進(jìn)紅細(xì)胞凝集。

上下游產(chǎn)品

上游

BD管系列

下游

免疫細(xì)胞培養(yǎng)基

間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基

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