Neural Differentiation Medium神經(jīng)分化培養(yǎng)基NDiff 227

Neural Differentiation Medium神經(jīng)分化培養(yǎng)基NDiff 227（Y40002）是一款成分確定、無血清、包含N2 & B27添加劑的*培養(yǎng)基，用于將單層貼壁生長的小鼠胚胎干細胞向神經(jīng)方向分化¹。該款培養(yǎng)基上市時間超過10年，一共有超過47篇文獻使用。

訂購信息

產(chǎn)品特征-Neural Differentiation Medium NDiff 227

成分確定、無血清的*培養(yǎng)基。

經(jīng)典配方，添加N2,B27。

只作用于小鼠細胞，有效促進小鼠胚胎干細胞向神經(jīng)方向分化。

添加其他因子后，可以維持人/小鼠干細胞培養(yǎng)。

圖一：分化培養(yǎng)中細胞形態(tài)變化

小鼠胚胎干細胞，在使用NDiff 227培養(yǎng)基單層貼壁培養(yǎng)后，分化為神經(jīng)細胞。

圖二：分化培養(yǎng)產(chǎn)物表達神經(jīng)細胞標志物Nestin和TUJ1

應用-Neural Differentiation Medium NDiff 227

單層貼壁培養(yǎng)下小鼠胚胎干細胞向神經(jīng)細胞分化。

單層貼壁條件下的胚胎干細胞維持培養(yǎng)。

文庫篩選化合物。

神經(jīng)分化的生物特性和功能性的研究與評價。

當添加如Ying QL et al. (2003)文章中的添加劑，Neural Differentiation Medium NDiff 227可以支持小鼠胚胎干細胞無血清、無飼養(yǎng)層培養(yǎng)²。

Neural Differentiation Medium NDiff 227添加生長因子，可以用于成功培養(yǎng)人胚胎干細胞系^{3, 4}。

當添加FGF后，無血清的Neural Differentiation Medium NDiff 227培養(yǎng)基可以將小鼠胚胎干細胞分化為早期的定型內(nèi)胚層細胞（Anterior Definitive Endoderm，ADE）前體，該前體可以高效分化為肝臟細胞和胰腺細胞⁵。

保存-Neural Differentiation Medium NDiff 227

-20℃保存，保質(zhì)期一年。融化后，4℃避光保存，4周內(nèi)使用。

使用方法-Neural Differentiation Medium NDiff 227

使用前準備：培養(yǎng)基避光水浴解凍，*解凍前轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基防止被加熱，再接著柔力混合解凍全部培養(yǎng)基。也可以避光4℃解凍。如果出現(xiàn)沉淀，4℃過夜放置使沉淀*溶解。培養(yǎng)基有可見沉淀時不能使用，要確保使用前已經(jīng)*溶解。

單層貼壁培養(yǎng)下的小鼠胚胎干細胞神經(jīng)分化：

1.在明膠包被的塑料培養(yǎng)器皿中，添加NDiff 227培養(yǎng)基，接種早期傳代的胚胎干細胞，接種密度：2.5 - 10 x 10³ cells/cm²。

2.每一兩天更換培養(yǎng)基。神經(jīng)分化早期預計會出現(xiàn)胚胎干細胞死亡造成的污染。

3.通過細胞形態(tài)和神經(jīng)元標記物染色監(jiān)控神經(jīng)元分化。培養(yǎng)4-6天后，神經(jīng)分化表現(xiàn)明顯，7-9天后神經(jīng)元成熟。

歡迎您致電咨詢Neural Differentiation Medium NDiff 227 華雅再生醫(yī)學旗艦公司：紅榮微再（上海）生物工程技術(shù)有限公司  ：152 1681 4001。華雅再生醫(yī)學-客服: 316 808 6348

背景知識

從胚胎干細胞或神經(jīng)干細胞直接分化成神經(jīng)細胞需要進行培養(yǎng)基優(yōu)化保證結(jié)果的可靠性。

Neural Differentiation Medium NDiff 227，神經(jīng)細胞分化的有效誘導培養(yǎng)基，通過使用傳統(tǒng)配方再添加N2和B-27，可以進行簡單高效的神經(jīng)分化。

1. 為什么研究“體外干細胞向神經(jīng)細胞分化"？

· 有一類病叫做神經(jīng)退行型疾病，常見的包括阿爾茨海默病、帕金森病。神經(jīng)退行性疾病的一個很顯著的現(xiàn)象就是腦細胞的消亡減少和腦細胞正常功能的喪失。

· 干細胞治療的概念在治療神經(jīng)退行性疾病的研究中有著很大的吸引力。生物醫(yī)學研究者的大概設(shè)想是，在體外（如細胞培養(yǎng)皿、細胞培養(yǎng)瓶）把干細胞定向誘導分化成為神經(jīng)細胞，獲得這些從干細胞分化來的神經(jīng)細胞后，把他們重新注射回到病人的腦部。這些注射回去的干細胞替代那些病人原來的不正常的干細胞，從而使得病人的癥狀得到緩解。

· 體外能夠把干細胞誘導分化出神經(jīng)細胞是干細胞治療zui為基礎(chǔ)的步驟。在2003年前的這方面的研究中，有兩個條件被認為二者必據(jù)其一（只考慮貼壁培養(yǎng)干細胞的方式）：*，認為干細胞生長后形成好多細胞聚集在一起的（多層細胞）集落，是干細胞向神經(jīng)細胞方向分化的必要條件；第二，認為與其他飼養(yǎng)層細胞共同培養(yǎng)是必須的（哺乳動物細胞貼壁培養(yǎng)時，使用飼養(yǎng)層細胞來支持或滋養(yǎng)干細胞生長）。但是按照這樣的條件，在培養(yǎng)中會造成一個很大的問題，即無法做到標準化地誘導干細胞分化為神經(jīng)細胞。簡單地說，就是似乎是*同樣的實驗條件，但是分化誘導的結(jié)果大不相同。這樣，是無法將獲得的神經(jīng)細胞用于后續(xù)的回輸實驗的，因為兩次實驗回輸?shù)募毎谏頎顟B(tài)上有明顯的差別。

· 因此，發(fā)現(xiàn)一個標準化的、少用外源因子（飼養(yǎng)層細胞是使用很多的外源因子）的方法，是“體外干細胞向神經(jīng)細胞分化"工作者必須解決的難題。

2. RHB-A和Neural Differentiation Medium NDiff 227培養(yǎng)基介紹

· 在2003年前，研究者發(fā)現(xiàn)在貼壁培養(yǎng)胚胎干細胞時，需要加入兩種因子去誘導干細胞分化成為神經(jīng)細胞，即N2和B27，其中Cellartis有N2添加劑。這兩種因子現(xiàn)在已經(jīng)成為神經(jīng)分化實驗中*的角色。

· 在2003年，蘇格蘭干細胞研究所的研究人員在Nature雜志上發(fā)表了一篇重要的研究報道，他們證明：

1）貼壁培養(yǎng)胚胎干細胞時，加入N2和B27后，超過半數(shù)的干細胞分化成為了神經(jīng)前體細胞；

2）這個實驗中，干細胞不形成聚落，單層生長。這個實驗中外源因子很少，高度可控。因此，這個實驗成為了體外誘導分化干細胞成為神經(jīng)細胞的標準實驗方案。這個培養(yǎng)基，就是Cellartis的Neural Differentiation Medium NDiff 227培養(yǎng)基。（conversion of embryonic stem cells into neuroectodermal precursors in adherent monoculture）。

· 2008年，Cellartis在Ndiff227培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上做了改進，研發(fā)出RHB-A培養(yǎng)基。葡萄牙的研究團隊比較了Ndiff227和RHB-A兩種培養(yǎng)基，發(fā)現(xiàn)貼壁培養(yǎng)干細胞誘導分化神經(jīng)細胞的實驗中，使用RHB-A培養(yǎng)基，形成神經(jīng)細胞的數(shù)量比使用Ndiff227的情況多出10%以上。

· RHB-A和Ndiff227廣泛應用于美國與歐州國家的科研實驗中，有多篇文獻可作為參考。

Neural Differentiation Medium NDiff 227僅供科研使用。

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