產(chǎn)品名稱：康為世紀(jì) 金牌無內(nèi)毒素質(zhì)粒大提試劑 負(fù)壓法

產(chǎn)品貨號(hào)：CW2107M

英文名稱：GoldVac EndoFree Plasmid Maxi Kit

產(chǎn)品規(guī)格：10 preps

產(chǎn)品介紹：

內(nèi)毒素是質(zhì)粒提取中常見的污染物，由于真核細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感，因此，如果質(zhì)粒中含有內(nèi)毒素會(huì)大大降低真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。本試劑盒提供一種快速、易大規(guī)模質(zhì)粒制備的新方法。每次可處理100-300 ml菌液，獲得多至2 mg轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒DNA。使用真空裝置可同時(shí)純化多個(gè)樣本，45分鐘即可完成質(zhì)粒提取，有效減少手動(dòng)操作時(shí)間。特殊的緩沖液系統(tǒng)和除內(nèi)毒素過濾器，有效去除內(nèi)毒素、基因組DNA、RNA、蛋白等雜質(zhì)。本試劑盒所得質(zhì)粒純度高、提取量大，特別適用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染，同時(shí)也可用于DNA測(cè)序，PCR，體外轉(zhuǎn)錄，內(nèi)切酶消化等實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品組份：

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.提取速度快:利用真空裝置，40分鐘內(nèi)快速純化多個(gè)樣本，有效減少手動(dòng)操作時(shí)間

2.提取得率高:可從100-300 ml菌液，獲得多至2 mg轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒DNA。

3.產(chǎn)品品質(zhì)高:提取的質(zhì)粒DNA適用于大多數(shù)細(xì)胞株的高級(jí)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。

配套試劑：

無水乙醇、異丙醇、真空泵、廢液收集裝置、真空純化裝置。

產(chǎn)品使用說明：

1．取100-300 ml過夜培養(yǎng)的菌液，加入離心管（自備）中，12,000×g離心2-3分鐘收集細(xì)菌，盡量吸棄全部上清。

2．向留有菌體沉淀的離心管中加入12 ml Buffer P1（請(qǐng)先檢查是否已加入RNase A），使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻，懸浮細(xì)菌沉淀

3．向離心管中加入12 ml Buffer P2，溫和地上下顛倒混勻8-10次，使菌體充分裂解，室溫放置3-5分鐘。此時(shí)溶液應(yīng)變得清亮粘稠。

4．向離心管中加入12 ml Buffer E3，立即上下顛倒混勻8-10次，此時(shí)出現(xiàn)白色絮狀沉淀，室溫放置5分鐘。將溶液全部倒入除內(nèi)毒素過濾器中，慢慢推動(dòng)推柄過濾，濾液收集在干凈的50 ml離心管中。

5．向?yàn)V液中加入0.3倍濾液體積的異丙醇，上下顛倒混勻

6．正確連接負(fù)壓裝置，將連接管與DNA吸附柱連接好后插到負(fù)壓裝置的插口上

7．柱平衡：向DNA吸附柱中加入2 ml Buffer PS，開啟并調(diào)節(jié)負(fù)壓至-300~-700 mbar，吸去柱上溶液。

8．將步驟5中濾液與異丙醇的混合溶液轉(zhuǎn)移到平衡好的吸附柱中，吸去柱上溶液。

9．向DNA吸附柱中加入10 ml Buffer PW吸去柱上溶液。

10.保持負(fù)壓抽吸10分鐘，除去吸附膜內(nèi)殘留漂洗液，干燥吸附膜。若一次抽吸6個(gè)樣品以上，可將負(fù)壓抽吸時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)。待吸附膜徹·底干燥后，關(guān)閉負(fù)壓開關(guān)。

11.將壓力恢復(fù)至0 mbar時(shí)，取下吸附柱，將DNA吸附柱置于一個(gè)新的50 ml離心管中，向吸附膜的中間部位加入1-3 ml Endo-Free Buffer EB，室溫放置2-5分鐘，12,000×離心5分鐘，將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。-20℃保存質(zhì)粒。

保存條件：

室溫 (15-30℃)

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

品牌             貨號(hào)                   名稱                                                規(guī)格

康為世紀(jì)    CW2107S       金牌超量無內(nèi)毒素質(zhì)粒大提試劑盒       2 preps

關(guān)于公司：

康為世紀(jì)生物科技股份有限公司是一家立足于生命科學(xué)領(lǐng)域，有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)，主要從事高附加值、高技術(shù)含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn)，為生命科學(xué)研究、基因檢測(cè)和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務(wù)。公司曾先后被評(píng)為國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)、江蘇省科技型中小企業(yè)、江蘇省瞪羚企業(yè)、江蘇省民營(yíng)科技企業(yè)。公司建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的技術(shù)創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺(tái)，構(gòu)建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。

產(chǎn)品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護(hù)劑、核酸提取試劑盒、分子診斷檢測(cè)試劑等，打破了中國(guó)生物研究與產(chǎn)業(yè)對(duì)進(jìn)口試劑的依賴。